许多用户在液相色谱仪的时候经常会遇到如何选择滤膜的困惑,经常会有用户由于滤膜的选择不当导致不必要的损失。下面本人就对液相使用中滤膜的选择做个简单小结。
1.常见滤膜
水系过滤膜,一般用于纯水相的过滤。在过滤含有机相的混合溶剂时应尽量避免使用水系滤膜,以防滤膜被溶解,因为水系滤膜一般由醋酸纤维素类的材料制成,耐有机溶剂性能较差。
有机系滤膜,本身也能过滤水,但水比较难浸润有机系滤膜,有些有机滤膜在水中超声几分钟使其浸润,或用有机溶剂润湿后也可以用于水系溶剂过滤。可以当然也可以先过滤甲醇再过滤水。混合系滤膜也可以用于水系溶剂过滤。但是,水系滤膜相对经济。
油系溶剂:采用专用的油系过滤膜,用于有机溶剂的过滤。混合系滤膜也可以用于有机溶剂过滤。
另外,如果该用有机相的滤膜,用了水的滤膜,滤膜会被溶解掉,导致管路堵塞。如果该用水的滤膜,用了有机相的滤膜,则流动相很难流下去。
2.微孔过滤膜Sartorius Series Membrane Filters
再生纤维素膜(Regenerated Cellulose Membranes,RC)为疏水型滤膜,具有 非特异性吸附低,特别适合于除微粒过滤,其化学兼容性强,可以耐受大多数有机溶剂,其化学兼容性如下表所示。直径50mm和47mm,孔径0.45µm作为标准用于溶剂的超净和脱气过滤以及HPLC 流动相的过滤。主要用于有机溶剂的过滤。
醋酸纤维素膜(Cellulose Acetate Membranes,CA)具有很高的流速和热稳定性以及非常低的吸附。0.2µm的滤膜非常适合于水溶液、缓冲液、血清和培养基的除菌过滤。0.45µm的滤膜非常适合于HPLC的流动相过滤。关于得到膜吸附的公开结果是比较困难的,其与过滤的物质、过滤的条件和采用的测定方法以及被测定的膜没有被预先除菌有关。主要用于水相溶液的过滤。
硝酸纤维素(Cellulose Nitrate Membranes,CN)是非常好的滤膜材料,其能够提供非常一致的孔径结构和宽的孔径规格。大的孔径(8µm,5µm和 3µm)用于趋药性和细胞截留,0.45µm用于微粒收集,最小的孔径(0.1µm)用于溶液的超净过滤和光散射测量。这种类型滤膜所具有的非特异性吸附性能使其非常利于许多印迹处理过程和诊断试剂的应用。用于样品预处理,颗粒检测或除颗粒。
聚四氟乙烯膜(PTFE Membranes,PTFE)采用完全由天然永久疏水的PTFE材质,即使在很低的压差下,也能保证潮湿空气或其它气体通行无阻,而水溶液则不能透过。其性能与亲水膜正好相反。PTFE滤膜具有极强的化学兼容性,几乎能胜任所有的有机溶剂和强腐蚀化学品的过滤。在必须用PTFE滤膜过滤水相溶液时,必须先用乙醇或异丙醇预浸润后,水相溶液才能滤过。用于空气、气体和疏水性化学品的过滤。
玻璃纤维滤膜(Glass Fiber Filters,GF)属于深层过滤,其主要用途是作为于过滤层,直接加在过滤膜上使用。注意:不同尺寸的滤器对预过滤膜的直径都有具体的要求,直径过大时,其边缘会伸到密封圈下引起漏液。用于提高过滤通过率和连续过滤。
尼龙膜(Polyamide Membranes,Nylon)具有非常好的机械强度,吸附性强,能耐受大多数有机溶剂和多数碱性溶液,特别适合于碱性溶液的过滤。用于有机溶剂过滤,如HPLC流动相除颗粒过滤时,尼龙膜比PTFE膜更经济实用,另外,尼龙膜还可以作为转印膜。由于尼龙膜的吸附性能相对较高,一般不推荐用于培养基过滤、或蛋白液等生物样品的过滤,以免因吸附而损失样品。在这种情况下,通常采用低吸附的醋酸纤维素膜(CA),更为适用。用于碱性溶液和有机溶剂过滤。